بررسي اثر مهار ژن Histon deacetylase 8 (HDAC8) بر بيان ژن‌هاي mTOR، FGF،FGFR ،IR ، IGFR،VEGF ،VEGFR ، PDGF و PDGFR

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

بيوشيمي باليني

مقدمه و اهداف: سرطان پستان شايع ترين سرطان تشخيص داده شده در جهان و همچنين علت اصلي مرگ و مير ناشي از سرطان در زنان است. تغيير در مكانيسم‌هاي اپي‌ژنتيك باعث شروع و پيشرفت سرطان پستان مي‌شود. هيستون داستيلاز 8 (HDAC8) به عنوان يك انكوژن توانمند در بدخيمي‌هاي مختلف عمل مي‌نمايد. براي درك بهتر عملكرد HDAC8 در پيشرفت سرطان پستان، ما اثر حذف HDAC8 را در سرطان پستان بر بيان ژن‌هاي مسيرهاي سيگنالينگ mTOR بررسي كرديم. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه از تكنولوژي CRISPR براي حذف بيان ژن HDAC8 در رده‌هاي سلولي سرطان پستان استفاده شد، به اين منظور دو gRNA طراحي شد و در وكتورPX459.V2(Addgene ID: 62988) كلون شد. وكتورهاي حاوي gRNA به داخل رده‌هاي سلولي سرطان پستان ترانسفكت شد و سپس اثر اين حذف بر بيان ژن‌هاي مسير سيگنالينگ mTOR با استفاده از روش real-time PCR تعيين گرديد. از نرم افزارGraphPad Prism و روش‌هاي آماري t-test و one-way ANOVA جهت آناليز آماري داده‌ها استفاده شد. يافته‌ها: تجزيه و تحليل نتايج qRT-PCR حاكي از كاهش بيان ژن‌هاي انتخابي در رده‌هاي سلولي با ژن HDAC8 ناك اوت شده در مقايسه با كنترل‌هاي بدون تيمار بود. اگرچه اين كاهش براي ژن‌هاي FGF2 و FGFR1 معنادار نبود، اما براي ژن‌هاي mTOR، IGF1R ، INSR ، VEGFA و VEGFR2 در هر سه رده سلولي كاهش معناداري از لحاظ آماري مشاهده شد. بعلاوه كاهش ژن‌هاي PDGFC و PDGFRA تنها در رده‌هاي سلولي TNBC معنادار بود. نتيجه گيري: در مجموع مطالعه ما نشان داد كه HDAC8 مي تواند اثرات انكوژني خود را با اثر برروي مسير سيگنالينگ mTOR اعمال كند و با مهار HDAC8 اين اثرات معكوس خواهد شد. كلمات كليدي: سرطان پستان؛ مسير سيگنالينگ mTOR؛ هيستون داستيلاز 8

207422

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

بيوشيمي

پزشكي

دانشگاه علوم پزشکي کردستان

محمد عبدي