بهينه سازي توليدكالوس و تاثير متيل جاسمونات بر روي متابوليت هاي ثانويه در زيره سياه (.Carum carvi L)

اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان

علوم و مهندسي مرتع

كارشناسي ارشد

روش كشت بافت گياهي به عنوان يكي از روش¬هاي كاربردي در حفاظت از گونه¬هاي گياهي در حال انقراض در اكوسيستم¬هاي مرتعي، و همچنين به منظور استخراج و افزايش توليد متابوليت¬هاي ثانويه گياهي به كار گرفته مي¬شود. اين مطالعه به منظور بهينه¬سازي توليد كالوس در زيره سياه (Carum carvi L.) و سپس توليد متابوليت هاي ثانويه تحت تاثير اليسيتور متيل جاسمونات در شرايط درون شيشه¬اي انجام گرفت. در ابتدا جوانه¬زني بذر به منظور توليد گياهچه در تيمارهاي مختلف مورد بررسي قرار گرفت. بذوري كه ابتدا به مدت 7 روز در معرض سرمادهي مرطوب قرارگرفتند، در محيط كشت موراشيگ و اسگوك (MS) همراه با 10 ميلي¬گرم / ليتر جيبرليك اسيد بالاترين سرعت جوانه¬زني(72/0 ميلي¬متر در روز) و درصد جوانه زني(93%) را در كل بازه زماني 14 روز نشان دادند. سپس ريزنمونه¬هاي هيپوكوتيل به منظور القاي كالوس به محيط كشت MS حاوي تنظيم كننده هاي رشدي مختلف منتقل شدند. تجزيه واريانس نشان داد كه متغيرهاي هورموني تاثير معني¬داري بر روي درصد كالوس¬زايي و سرعت رشدكالوس داشتند. تركيب رشدي 2 ميلي¬گرم/ ليتر نفتالين استيك اسيد(NAA) + 5/0 ميلي¬گرم/ ليتر بنزيل آمينو پورين(BAP) در محيط كشت موراشيك و اسكوگ بهترين درصد توليد كالوس (8/%94) و سرعت رشد كالوس (43/0 ميلي¬ متر/ روز) را نشان داد. به منظور بررسي تاثير اليسيتور متيل جاسمونات بر روي ميزان متابوليت¬هاي ثانويه در كالوس، غلظت¬هاي مختلف متيل جاسمونات (0 ، 25 ،50 و 100 ميكرومولار) به عنوان اليسيتور انتخاب شدند. اثرات آن¬ها برمحتواي مالون دي آلدهيد، رشد كالوس، محتواي كل فنول، محتواي كل فلاونوئيد، محتواي كل فلاونول، آنتوسيانين، محتواي كل كلروفيل، كاروتنوئيد، فعاليت آنتي اكسيداني به روشDPPH، آنزيم PAL،كارون و ليمونن مورد بررسي قرار گرفت. متيل جاسمونات نتايج مثبتي بر محتواي متابوليت¬هاي ثانويه و فعاليت آنتي اكسيداني در كالوس ايجاد كرده است. همچنين بالاترين ميزان محتواي كل فنول، محتواي كل فلاونوئيد، آنتوسيانين، آنزيمPAL، كلروفيل كل، محتواي آب نسبي كالوس، ليمونن و كارون در تيمار50 ميكرومولار متيل جاسمونات و بيشترين ميزان محتواي فلاونول، كاروتنوئيد و سرعت رشدكالوس در تيمار25 ميكرومولار متيل جاسمونات مشاهده شد. بيشترين ميزان فعاليت آنتي اكسيداني و مالون دي آلدهيد در تيمار متيل جاسمونات با غلظت 100 ميكرومولار مشاهده شد. استفاده از غلظت بهينه متيل جاسمونات مي-تواند منجر به توليد حداكثري دو تركيب داروئي ارزشمند (كارون و ليمونن) از طريق كشت كالوس در زيره سياه شود.

211530

گياهان دارويي و صنعتي

مهندسي منابع طبيعي

دانشگاه صنعتي اصفهان

مصطفي تركش اصفهاني

حسين بشري، محمدرضا وهابي

پوراندخت گلكار