بررسي تاثير افزودن عصاره جنين پرندگان به محيط كشت جنين بر تكوين رويان حاصل از لقاح آزمايشگاهي در گونه گوسفند

سرم زغال‌شويي شده (CSS) به عنوان يك مكمل رايج در كشت جنين حيوانات مزرعه مورد استفاده قرار مي‌گيرد. اگرچه بهره گيري از آن مؤثر است اما داراي معايب متعددي از جمله هزينه بالا، فرآيند توليد طولاني و نياز به ارز خارجي دارد. عصاره جنين پرندگان (Avian Embryo Extract) يك تركيب مغذي و زيست فعال بوده كه سرشار از پروتئين‌ها، اسيدهاي آمينه، ويتامين‌ها و فاكتورهاي رشد ضروري براي تحريك رشد و تكثير سلول‌ها مي‌باشد. اين عصاره به دليل توانايي خود در تسريع تكثير و مهاجرت سلول‌ها و فراهم كردن مواد مغذي پيچيده، در زمينه‌هاي مختلف تحقيقاتي مانند كشت انواع سلول‌ها از جمله سلول‌هاي بنيادي مانند سلول‌هاي بنيادي تاج عصبي و فوليكول مو به عنوان مكمل محيط كشت استفاده شده است. با توجه به اين موارد، پژوهش حاضر با هدف ارزيابي AEE به عنوان جايگزيني براي CSS در محيط كشت جنين گوسفندي طراحي و اجرا شد. ابتدا تخم‌مرغ‌هاي بارور عاري از پاتوژن تهيه شد و به مدت 11 روز در انكوباتور مرطوب با دماي 37 درجه سانتي‌گراد نگهداري شدند. پس از باز كردن تخم‌مرغ‌ها و طي انجام مراحل لازم، عصاره جنين جوجه استحصال و جمع‌آوري شد. سپس، تخمك‌هاي لقاح يافته گوسفندي در شرايط آزمايشگاهي، در حضور نسبت‌هاي مختلفي از AEE شامل: 0، 5/2، 5، 5/7 و 10 درصد همراه با CSS با نسبت‌هاي به ترتيب 10، 5/7، 5، 5/2 و 0 درصد به مدت 7 روز در انكوباتور تحت شرايط %5 CO2، 5% O2، دماي 5/38 درجه سانتي‌گراد و حداكثر رطوبت قرار گرفتند. سپس در روز سوم و روز هفتم كشت جنيني به ترتيب نرخ تسهيم و تشكيل بلاستوسيست مورد ارزيابي قرار گرفت. نرخ تسهيم در روز سوم تفاوت معني‌داري بين گروه‌ها نشان نداد. محيط كشت حاوي %10 AEE به طور معني‌داري (05/0p<‎) نرخ بلاستوسيست را نسبت به ساير گروه‌هاي تيماري افزايش داد. در ارزيابي‌هاي انجام گرفته در بلاستوسيست‌ها، در شاخص‌هاي توده سلول‌هاي داخلي، تعداد سلول‌هاي تروفكتودرم و همچنين تعداد كل سلول‌هاي بلاستوسيست بين گروه‌هاي تحت تيماري مختلف تفاوت معني‌داري مشاهده نگرديد. ميزان گلوتاتيون (GSH) در بلاستوسيست‌هاي به دست آمده در گروه % 10 AEE نسبت به گروه 10% CSS افزايش معني‌داري داشت (05/0p<‎) با اين وجود در ميزان گونه‌هاي فعال اكسيژن (ROS) تفاوت معني‌داري مشاهده نشد. شاخص توده ميتوكندريايي در گروه %10 AEE نسبت به گروه 10% CSS به طور محسوس افزايش يافت (05/0p<‎)، در حالي كه در اختلاف پتانسيل غشاي ميتوكندريايي تفاوت معني‌داري بين دو گروه وجود نداشت. همچنين نرخ بلاستوسيست به دنبال استفاده از %10 AEE در محيط كشت جنين گاو حاصل از لقاح تخمك هاي استحصال شده (OPU) با روش سونوگرافي واژينال نسبت به گروه 10% CSS افزايش معني‌داري نشان داد (05/0p<‎). اين تحقيق عصاره جنين پرندگان را به عنوان مكملي براي محيط كشت جنين گوسفند و گاو ارزيابي كرد و نتايج اميدواركننده‌اي را به عنوان جايگزيني براي سرم زغال‌شويي شده نشان داد. با توجه به يافته‌هاي فوق، انجام تحقيقات بيشتر با استفاده از جنين ساير گونه‌ها، با نسبت‌ها و شرايط متفاوت كشت توصيه مي‌شود. علاوه بر اين بررسي بيشتر نتايج پس از لانه‌گزيني و همچنين بررسي ويژگي‌هاي نتاج حائز اهميت است.

236885

فيزيولوژي دام و طيور

مهندسي كشاورزي

دانشگاه صنعتي اصفهان