شناسايي ژنوتايپ ايزوله هاي ژياردياي جدا شده از بيماران مراجعه كننده به مراكز آموزشي، درماني شهر رشت در سال 1395

رشت

انگل شناسي

زمينه و هدف : ژيارديا يكي از شايع ترين انگل هاي تك ياخته اي روده انسان و پستانداران مختلف در سرتاسر جهان مي باشد. اين انگل در انسان معمولا به وسيله مواد غذايي و آب هاي آلوده به كيست انتقال مي يابد. از ميان شش گونه شناخته شده ژيارديا، فقط ژيارديا لامبليا انسان را آلوده مي كند؛ اين گونه همچنين تعداد زيادي از پستانداران را نيز، آلوده مي كند. فراواني ژنوتايپ ژيارديا در مناطق مختلف جهان متفاوت بوده و الگوهاي متعدد انتقال را نشان مي دهد. ژنوتايپ هاي A و B انسان و طيف وسيعي از حيوانات را آلوده مي كند. هدف از اين تحقيق شناسايي ژنوتايپ ايزوله هاي جدا شده از بيماران مراجعه كننده به مراكز آموزشي درماني شهر رشت در سال 1395 با استفاده از روش PCR و تعيين توالي بود. مواد و روش ها : در اين مطالعه تعداد 30 نمونه مدفوع مثبت ژيارديا كه در طي يكسال از فروردين تا اسفند ماه 95 از مراكز آموزشي درماني شهر رشت جمع آوري گرديده بود جهت تعيين ژنوتايپ انتخاب شد؛ و پرسشنامه اي شامل اطلاعات دموگرافيك و اپيدميولوژيك براي هر بيمار تكميل گرديد. تشخيص آلودگي با تهيه گسترش مستقيم با استفاده از سرم فيزيولوژي و محلول لوگول صورت گرفت. DNA كيست ها با تكرار روش ذوب و انجماد و كيت استخراج DNAاز مدفوع به خوبي استخراج شد. سپس واكنش دو مرحله اي Nested-PCR Semi بر روي DNA استخراج شده، در ناحيه ژني گلوتامات دهيدروژناز انجام گرفت. محصول PCR به منظور تفكيك ژنوتايپ ها و زير ژنوتايپ ها با روش تعيين توالي به شركت تكاپو زيست ارسال شد. همچنين داده هاي مربوط به علايم باليني بيماران از طريق پرسشنامه تهيه و ارتباط آن با نتايج مولكولي، مورد بررسي قرار گرفت. نتايج : استخراج DNA از كيست در مورد همه ايزوله هاي انتخابي به طور موفقيت آميزي انجام گرفت. تعيين توالي محصول PCR ژنوتايپ هاي شايع انساني ( BوA ) را نشان دادند. آناليز تعيين توالي بر روي نمونه هاي ارسالي جهت سكانس ژني نشان داد كه تعداد 28 ايزوله (3/93%) مربوط به ژنوتايپ A ساب تايپ A2 و 2 ايزوله (7/6 %) هم مربوط به ژنوتايپ B ساب تايپ B4 بودند. بحث : روش nested-PCR Semi و تعيين توالي، يك روش آناليتيك مناسب براي تعيين ژنوتايپ انگل ژيارديا لامبليا با استفاده از ژن هاي ناحيه ي گلوتامات دهيدروژناز مي باشد. ژنوتايپ A2 به عنوان زير ژنوتايپ انساني و زيرژنوتايپ B4 به عنوان زيرژنوتايپ زئونوز مطرح مي باشد. اين نتايج نشان دهنده اين است كه الگوي انتقال انسان به انسان (آنتروپونوتيك) در اين منطقه شايع تر بوده و به نظر مي رسد؛ انسانها به عنوان مهمترين مخزن و منبع آلودگي به اين انگل، محسوب مي شوند. واژه هاي كليدي : ژيارديا لامبليا، گلوتامات دهيدروژناز، ژنوتايپ، تعيين توالي

30722

پزشكي

علوم پزشكي گيلان

اشرفي، كيهان Ashrafi, Keyhan , فرقانپرست، كامبيز Forghanparast, Kambiz

محمودي، محمدرضا