عنوان
بررسي اثر اسپورامين تخليص شده از سيب زميني شيرين (Ipomoea batatas L.( lam)) بر بقا، آپوپتوز و بيان ژن p53 و MDM2 در سلول هاي سرطان پستان رده MCF-7
نويسنده اصلي
قيوميان، مرضيه
محل تحصيل
لنگرود
رشته تحصيلي
زيست فناوري پزشكي
چكيده
مقدمه: سرطان پستان در دنيا و ايران داراي شيوع بالايي است. به دليل هزينه بالا و عوارض روشهاي شيمي درماني، محققان به دنبال يافتن داروهاي كم هزينه و با منشأ گياهي مي باشند. سيب زميني شيرين حاوي مهاركننده پروتئازي بنام اسپورامين است. از آنجائيكه مهاركنندگان پروتئازي از سركوب گران مؤثر شروع و تشكيل سرطان هستند، در اين تحقيق براي اولين بار اثر اسپورامين تخليصي از سيب زميني شيرين بر رشد، القاي آپوپتوز و بيان ژنهاي دخيل در آپوپتوز در سلول هاي سرطان پستان رده MCF-7 مورد بررسي قرار گرفت.
مواد و روش ها: ابتدا به منظور تخليص اسپورامين، پروتئين هاي محلول در عصاره آبي تهيه شده از سيب زميني شيرين با سولفات آلومينيوم رسوب داده شدند. رسوب نمكي دياليز و جهت تخليص نهايي كروماتوگرافي تعويض يوني انجام شد. به منظور تأييد هويت پروتئين روش SDS-PAGE به كار برده شد. پس از كشت سلول هاي MCF-7 در محيط مناسب، جهت بررسي ميزان تكثير سلول ها در پي تيمار، تست MTT انجام و به منظور بررسي نوع مرگ ايجاد شده، تكنيك فلوسايتومتري به كار برده شد. مطالعه بيان ژنهاي دخيل در آپوپتوز از طريق تكنيك Real Time PCR صورت گرفت.
ننايج: پس از تأييد هويت پروتئين، نتايج تست MTT بيانگر وجود رابطه ميان كاهش رشد سلول ها با گذشت زمان و افزايش غلظت اسپورامين بود. هنگاميكه سلول ها در معرض غلظتهاي افزايشي اسپورامين قرار گرفتند، ميزان IC50در 24 و 48 ساعت به ترتيب 950 و 250 ميكروگرم بر ميلي ليتر برآورد شد. نتايج حاصل از فلوسايتومتري نشان داد برخلاف سلول هاي نرمال و زنده گروه كنترل، پس از 24 و 48 ساعت به ترتيب حدود 30 و 37 درصد سلول هاي گروه تيمار در مراحل ابتدايي آپوپتوز و درصدي اندك در مراحل پاياني آپوپتوز قرار داشتند. همچنين به دنبال تيمار سلول ها بمدت 24 و 48 ساعت، بيان ژنهاي Fas، Bax وp53 افزايش و بيان ژن Bcl-2 كاهش يافت.
بحث: اسپورامين استخراجي از سيب زميني شيرين توانست تكثير سلول هاي سرطان پستان را با الگويي وابسته به دوز و وابسته به زمان مهار كند. همچنين اسپورامين قادر به القاي مرگ آپوپتوزي از طريق هر دو مسير خارج و داخل سلولي مي باشد. بنابراين با توجه به هزينه اندك، استخراج آسان و پس از بررسي هاي بيشتر، مي توان اسپورامين را به عنوان كانديد مناسبي در درمان سرطان پستان مورد توجه قرار داد.
كلمات كليدي: آپوپتوز، اسپورامين، روش MTT،روش Real Time PCR، سيب زميني شيرين، سرطان پستان، فلوسايتومتري
شماره ركورد
3328
دانشكده
پيراپزشكي شرق گيلان
دانشگاه
علوم پزشكي گيلان
استاد مشاور
نيكوكار، ايرج , اميدي، مريم
استاد راهنما
كبيري، آزاده , خانكي، كورش