بررسي عوامل موثر بر القاء ريشه مويين و توليد متابوليت هاي ثانويه در گياه پروانش (Catharanthus roseus

دانشگاه ولي عصر(عج) رفسنجان

كارشناسي ارشد

ريشه‌هاي مويين حاصل از تلقيح با آگروباكتريوم رايزوژنز جهت توليد و تجمع متابوليت‌هاي ثانويه گياهي مناسب مي¬باشند، زيرا ريشه‌هاي تغييريافته ژنتيكي برخلاف سوسپانسيون سلولي، متابوليت‌هاي ثانويه را با ثبات ژنتيكي و بيوسنتزي بيشتري در محيط كشت‌هاي فاقد هورمون توليد مي‌كنند. پروانش (Catharanthus roseus) يكي از گياهان دارويي مهم و از تيره خرزهره (Apocynacea) مي‌باشد. از ميان ۱۳۰ نوع آلكالوئيد ايندولي ترپنوئيدي كه در اين گياه شناسايي شده است، آلكالوئيدهاي وين‌بلاستين و وين‌كريستين از اهميت ويژه‌اي برخوردارند. در اين تحقيق به منظور القاء ريشه مويين، ريزنمونه‌هاي برگ و ساقه دو نوع از ژنوتيپ‌هاي گياه پروانش با سه سويه مختلف از باكتري آگروباكتريوم رايزوژنز تلقيح و بر روي سه محيط كشت گياهي مختلف كشت شدند. تعداد ريشه هاي توليد شده در تيمارهاي مختلف محيط كشت ثبت گرديد. تائيد ريشه هاي مويين با استفاده از واكنش PCR براي تكثير اختصاصي ژن هاي rolB و virD انجام شد. بر اساس شدت ريشه زايي حاصل از سويه هاي آگروباكتريوم در محيط كشت هاي مختلف، بهترين سويه آگروباكتريوم به همراه محيط كشت بهينه جهت تثبيت كشت ريشه هاي مويين پروانش تعيين گرديدند. سويه A4 و محيط كشت MS 2/1 به ترتيب به عنوان بهترين سويه جهت القاي ريشه مويين در گياه پروانش و بهترين محيط كشت براي توسعه و استقرار كشت ريشه هاي مويين در ژنوتيپ سفيد پروانش تعيين گرديد. از دستگاه HPLC براي اندازه گيري آلكالويئدها استفاده شد.

53615

دانشگاه وليعصر رفسنجان

بيوتكنولوژي كشاورزي

محسن محمودنيا ميمند.