عنوان
بررسي اثرات تخريب ژن BIRC5 در رده هاي سلولي لوسمي ميلوئيد حاد، HL-60 و KG-1، با استفاده از سيستمهاي نيكاز و نوكلئاز CRISPR/Cas9
نويسنده اصلي
نريماني، منيژه
محل تحصيل
دانشگاه علوم پزشكي كردستان
رشته تحصيلي
پزشكي مولكولي
چكيده
چكيده فارسي
لوسمي ميلوئيد حاد ) AML ( يكي از بدخيميهاي پيشروندهي خون است كه در اثر توقف در تمايز سلولهاي ميلوئيد و در نتيجه
تكثير كلونال و بيرويهي پيشسازهاي ميلوئيدِ بدخيم و تجمع آنها در مغز استخوان و خون ايجاد ميشود. گرچه بيشتر بيماران
با درمانهاي رايج شيميدرماني وارد دورهي بهبودي ميشوند اما در اكثريت بيماران، عودِ مجدد بيماري مشاهده ميشود. در
بين انواع مختلف آنتيژنهاي مرتبط با لوسمي، ژن BIRC5 كه پروتئين مهاركنندهي آپوپتوز باكولوويروسي حاوي تكرار 5 و يا
survivin را رمز مينمايد، ماركر تشخيصي بسيار مهمي بوده، ارتباط تنگاتنگي با ايجاد سرطان داشته و چهارمين رونوشتي
است كه به ميزان فراوان در سرطانها بيان ميگردد.
survivin ، داراي واريانتهاي مختلفي است و نقش مهمي را در آپوپتوز، تقسيم و تكثير سلولي ايفا مينمايد به طوريكه در
مراحل جنيني و روياني به ميزان زيادي بيان ميگردد. افزايش بيان اين پروتئين در اكثر سرطانها مشاهده شده و با مقاومت به
شيميدرماني، افزايش عود، كاهش بقاي بيمار و پيشرفت سرطان همراه است. در بيماران مبتلا به AML ، بيان survivin و
واريانتهاي پيرايشي آن با تعداد گلبولهاي سفيد خون، پاسخ باليني، سيتوژنتيك و ميزان بقا مرتبط است. تا كنون در مورد
برخي از سرطانها بررسي ناكدان اين ژن توسط تكنيكهاي RNAi و miRNA صورت گرفته اما بررسي ناكآوت و تخريب
كامل آن تا به حال بررسي نشده است. لذا، در اين مطالعه براي اولين بار تخريب ژن توسط دو سيستم نوكلئاز و نيكاز
CRISPR/Cas9 مطالعه شد. نتايج مطالعهي حاضر نشان داد كه هدفگيري ژن با استفاده از فنآوري CRISPR/Cas بسيار
خوب بوده و ژن به طور كارآرايي ناكآوت شده است. مقايسهي نتايج بيان ژن با استفاده از qRT-PCR نشان داد كه بيان ژن
در گروههاي تست كاهش چشمگيري داشته و كاملا با گروه كنترل اختلاف معنادار دارد. تستهاي بقا و آپوپتوز سلولها با
استفاده از MTT و فلوسايتومتري نيز مويد آن بودند كه در سلولهايي كه با استفاده از سيستمهاي نوكلئاز و نيكاز
CRISPR/Cas9 مورد هدف قرار گرفته بودند در مقايسه با گروه كنترل، ميزان مرگ و مير و آپوپتوز به طور معناداري بيشتر
شده است.
در مجموع، اين مطالعه بيان ميدارد كه استفاده از سيستم CRISPR براي تخريب ژن BIRC5 ، روشي نوين و سودمند جهت
درمان تغييرات ژنتيكي مرتبط با لوسمي در انسان ميباشد و ميتواند به عنوان مقدمه و سرنخي براي طراحي مطالعات
بزرگتر و نهايتا كارآزماييهاي باليني باشد. به علاوه، نتايج تحقيق ما و گزارشاتي كه اخيرا توسط ساير محققين به چاپ رسيده
همگي اذعان ميدارند كه پروتوانكوژن BIRC5 اثرات معكوس در درمان بيماران مبتلا به AML دارد لذا اين ژن ميتواند كانديد
مناسبي جهت هدفگيري در درمان بيماران مبتلا به AML باشد. در آيندهي نزديك، با استفاده از فنآوري CRISPR/Cas در
بالين، ميتوان از درمان سنتي بيماران به سمت پزشكي فردمحور قدم برداشت و اهداف بلندمدت ريشهكني سرطان را هر چه
سريعتر محقق نمود.
كلمات كليدي: لوسمي ميلوئيد حاد، پروتئين survivin ، ژن BIRC5 ، سيستم نوكلئاز CRISPR/Cas9 ، سيستم نيكاز
CRISPR/Cas9 ، ناكآوت ژن
شماره ركورد
81110
شهر محل تحصيل
دانشگاه علوم پزشكي كردستان
گرايش رشته تحصيلي
پزشكي مولكولي
دانشكده
پزشكي
دانشگاه
دانشگاه علوم پزشکي کردستان
استاد راهنما
علي جليلي، محمدرضا شريفي